Unidad de Cultivos Celulares
Presentación
El centro fue creado en 1990 con el fin de ofrecer apoyo a los investigadores en el uso de los cultivos de células animales, estando incluido en la Red de Laboratorios e Infraestructuras de la Comunidad de Madrid.
La mayoría de los proyectos de investigación biológica conllevan la necesidad de utilizar cultivos celulares de distinta naturaleza; de ahí, la necesidad de contar con unas instalaciones apropiadas que contengan un aparataje común para todos los usuarios. Este centro de apoyo pone a disposición de la comunidad universitaria, así como de otras instituciones públicas y privadas, la posibilidad de cultivar todo tipo de células animales, tanto cultivos primarios como líneas celulares establecidas, y el empleo de diferentes técnicas que permitan su estudio y caracterización a nivel molecular y celular. Así mismo, se ofrecen una serie de servicios como microscopia confocal, citometría de flujo y ensayos de citotoxicidad.
La Unidad de Cultivos Celulares participa en NANBIOSIS, clúster de equipamiento científico-tecnológico de alto nivel puesto a disposición de la comunidad científica de sectores públicos y privados, constituyendo la Unidad 17 “Servicio de Microscopia confocal” de dicha institución
Servicios especializados
- Facilitar a los usuarios el uso y aprovechamiento de las instalaciones de que dispone.
- Asesorar en las condiciones particulares para el cultivo de células específicas.
- Informar de la disponibilidad de bancos de células, comerciales o no.
- Mantenimiento de líneas celulares en Biobanco en vapor de nitrógeno.
- Manteamiento de la infraestructura para su correcto funcionamiento y posterior uso por parte de los investigadores.
- Dar soporte investigador a los diferentes equipos de Investigación.
- Asesorar en la realización de ensayos de citometría y microscopia confocal. Elección de anticuerpos, fluorocromos y sondas para las diferentes aplicaciones.
- Prestar servicio a centros públicos o empresas privadas en el marco de convenios o acuerdos que se establezcan.
- Asesoramiento en el uso de la infraestructura de la Unidad, así como de las técnicas más usuales en cultivos celulares.
Aplicaciones
- Ensayos de Citometría de Flujo: análisis de ciclo celular, apoptosis, producción de radicales libres, inmunofenotipaje, proliferación CSFE y BrdU, receptores, etc.
- Estudios de Microscopia Confocal con diferentes fluorocromos, anticuerpos y sondas fluorescentes: FITC, Rhodamina, TRITC, Alexa -488, Alexa 633, etc. Ensayos in vivo.
- Utilización de la Infraestructura necesaria para el trabajo de cultivos celulares de forma autónoma por el usuario.
- Realización de curvas de crecimiento, proliferación y pruebas de citotoxicidad.
- Preparación de placas de agar y medios de uso en Microbiología.
- Filtración de medios termolábiles para su esterilización.
- División y mantenimiento de cultivos celulares por técnico especializado.
- Congelación de células y mantenimiento en Banco de Células mediante nitrógeno líquido.
- Fotografía Digital de microscopia óptica y de fluorescencia de los cultivos celulares.
- Esterilización de material de uso frecuente en cultivos. Autoclave y esterilización por plasma.
- Preparación de muestras para histología: procesador de muestras automatizado, estación de parafina, micrótomo y diferentes tinciones. Tanto por parte del usuario como por el técnico especialista.
Equipamiento
- Microscopio Confocal LEICA TCS-SP5
- Láser Argón: 488 nm.
- Láser Helio-Neón: 561 nm.
- Láser Helio-Neón: 633 nm.
- Láser UV: 405 nm.
- Posibilidad de ensayos in vivo.
- Citómetro de flujo MACSQuant Analyzer 10
- Láser Violeta 405 nm de excitación. Detectores V1/V2.
- Láser Argón (Azul) 488 nm de excitación. Detectores B1/B2/B3/B4.
- Láser Rojo 633 nm de excitación. Detectores R1/R2.
- Microscopio invertido de contraste de fases (NIKON).
- Microscopio directo OPTIKA, objetivos 4x/10x/20x/100x. Preparaciones histológicas.
- Microscopio de fluorescencia Leica DM IL LED. Con objetivos 5x/10x/20x/40x. Canales para fluorescencia azul (DAPI) /verde (FITC, GFP, etc.) y rojo (Rodamina, etc.). Sistema de captación de imágenes y software de análisis.
- Incubador CO2/Temperatura, para mantenimiento de cultivos celulares (3 unidades).
- Cabina de flujo vertical (2) (TELSTAR).
- Cabina de Flujo de Bioseguridad (TELSTAR).
- Cabina de Flujo horizontal para preparación de medios (TELSTAR).
- Agitador orbital (LAB-LINE).
- Cito centrífuga (THERMO).
- Centrifuga refrigerada en sala de cultivos. Marca Eppendorf (modelo 5810R), con adaptadores para diferentes tipos de tubos y para placas de cultivo.
- Electroporador BTX600.
- Lector de placas FLUOstar Omega: absorbancia (todas las longitudes de onda) / fluorescencia (355-20/460; 544/590-10; 485-12/EM520) / TR-EX (em. 645-20)
- Espectrómetro UV visible.
- Contenedor de nitrógeno (vapor) CBS-1500-Eurocyl 180 (banco de células).
Contador automático de células COUNTESS (Invitrogen).
Tarifas
Reserva de equipos
Las reservas para la utilización del citómetro de flujo y el microscopio confocal se realizarán a través de la antigua web del CAI Medicina-Biología, en el apartado de “calendario de reservas”, hasta la próxima instauración del sistema de gestión de laboratorios (LIMS). Para el resto de los equipos las reservas se realizarán en la propia Unidad, en los formularios habilitados al efecto.
